高中生物pcr?PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的高溫變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,那么,高中生物pcr?一起來了解一下吧。
變性:94度 復(fù)性:55度 延伸:72度
2種引物
DNA聚合酶
DNA模板
4張脫氧核糖核苷酸
引物可以是一小段DNA或RNA
PCR技術(shù)的基本原理
⑴PCR技術(shù)的基本原理:該技術(shù)是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板,借助一小段雙鏈DNA來啟動合成,通過一個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結(jié)合,形成部分雙鏈。在適宜的溫度和環(huán)境下,DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3′-OH末端,并以此為起始點,沿模板5′→3′方向延伸,合成一條新的DNA互補鏈。
PCR反應(yīng)的基本成分包括:模板DNA(待擴增DNA)、引物、4種脫氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和適宜的緩沖液。類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的高溫變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準備;②模板DNA與引物的低溫退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;③引物的適溫延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性-退火-延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。
dNTP
d代表五碳糖是脫氧核糖
N代表A,G,C,T
T代表3個
PCR合成中的原料是dATP,dGTP,dCTP,dTTP,相應(yīng)的稱呼就是脫氧三磷酸?苷,為什么加這些直接不加脫氧核糖核苷酸,因為合成過程需要能量,加以上原料既提供了脫氧核苷酸,又提供了能量(不知有沒有發(fā)現(xiàn),其中一個是dATP,很像ATP,里面同樣有高能磷酸鍵可供能)
選D,因為B和C都是蛋白質(zhì),pcr技術(shù)是擴增DNA的;體細胞DNA是相同的,不同的是表達產(chǎn)物,所以白細胞DNA即你自身的基因組DNA,這個不能檢測是否感染病毒,艾滋病可通過血液傳播,若感染了艾滋病,血液中會有大量艾滋病病毒,所以選D。
引物是一段已知目的基因的核苷酸序列,需要復(fù)制的基因不在那上面,只是為了好結(jié)合,然后開始復(fù)制出下面那一段的目的基因
以上就是高中生物pcr的全部內(nèi)容,PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右)。