微生物染色？微生物檢驗常用染色法如下：1、革蘭氏染色法；2、抗酸染色法；3、美蘭染色法；4、異染顆粒染色法；5、細菌鞭毛染色法；6、莢膜染色法芽孢染色法；7、布氏桿菌科茲洛夫斯基染色法；8、結(jié)核桿菌熒光染色法等主要染色法。那么，微生物染色？一起來了解一下吧。
檢驗常用染色法包括 1）革蘭氏染色法 2）抗酸染色法 3）美蘭染色法 4）異染顆粒染色法 5）細菌鞭毛染色法 6）莢膜染色法芽孢染色法 7)布氏桿菌科茲洛夫斯基染色法 8)結(jié)核桿菌熒光染色法等主要染色法 革蘭氏染色法染液配制 1。結(jié)晶紫染液：稱取結(jié)晶紫（龍膽紫）14g，溶于95%酒精100ml中，配成飽和液，再取飽和液20ml與1%草酸銨溶液（1g草酸銨溶于100ml蒸餾水溶解即成）80ml混勻即成2。盧戈氏碘液：碘化鉀2g于10ml蒸餾水中，再加碘1g，待碘全部溶解后（時間較長）加蒸餾水200ml即成3。95%酒精4。（1）石碳酸復(fù)紅液：稱取堿性復(fù)紅（堿性品紅）4g溶于95%酒精100ml中成飽和液，再取飽和液10ml與5%石碳酸溶液（5ml石碳酸溶于100ml蒸餾水）90ml混勻即成，（2）稀釋石碳酸復(fù)紅液：取石碳酸復(fù)紅液10ml加入蒸餾水90ml即成染色方法：1。涂片 將菌液直接涂在載玻片上，經(jīng)培養(yǎng)的菌落要加生理鹽水混勻涂片，等待干燥（固定）2。將結(jié)晶紫染液滴加在已固定的涂片上，染色1分鐘后用水沖去剩余燃料3。滴加盧戈氏碘液1分鐘后水洗，在滴加95%酒精脫色，搖動玻片至紫色不在脫色為止（約需1分鐘），水洗4。
機制：對細菌細胞壁的詳細分析，為解釋革蘭氏染色的機制提供了較充分的基礎(chǔ)。目前多用物理機制來解釋革蘭氏染色現(xiàn)象。革蘭氏染色結(jié)果的差異主要基于細菌細胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分不同。通過初染和媒染，在細菌細胞膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。G+ 細菌由于細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯(lián)緊密，故用乙醇洗脫時，肽聚糖層網(wǎng)孔會因脫水而明顯收縮，再加上的G+ 細菌細胞壁基本上不含類脂，故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙，因此，結(jié)晶紫與碘復(fù)合物仍牢牢阻留在其細胞壁內(nèi)，使其呈現(xiàn)藍紫色。G- 細菌因其細胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散，故遇乙醇后，肽聚糖層網(wǎng)孔不易收縮，加上它的類脂含量高，所以當(dāng)乙醇將類脂溶解后，在細胞壁上就會出現(xiàn)較大的縫，這樣結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物就極易被溶出細胞壁。因此，通過乙醇脫色，細胞又呈現(xiàn)無色。這時，再經(jīng)番紅等紅色染料復(fù)染，就使G- 細菌獲得了新的顏色——紅色，而G+ 細菌則仍呈藍紫色（實為紫中帶紅）。?要點：1、 待檢菌菌齡應(yīng)為18-24小時。一般情況下，革蘭氏陰性菌的染色反應(yīng)較為穩(wěn)定，不易受菌齡的長短影響；而革蘭氏陽性菌，有的在幼齡時呈陽性，超過24小時可變?yōu)殛幮浴９逝囵B(yǎng)物越陳舊，菌細胞衰老、死亡，則染色常為陰性，造成錯判。
因為大部分微生物細胞中沒有色素沉積，多是無色透明的，所以要經(jīng)過染色對不同結(jié)構(gòu)進行觀察。不染色時，也可通過相差或DIC模式進行觀察。
其重要的臨床意義在于：
1、鑒別細菌
2、選擇藥物
3、與致病性有關(guān)：革蘭氏陽性菌能產(chǎn)生外毒素，而內(nèi)毒素主要是指革蘭氏陰性菌胞壁成分中的脂多糖，兩者的致病作用不同。
革蘭氏染色是用來鑒別細菌的一種方法：這種染色法利用細菌細胞壁上的生物化學(xué)性質(zhì)不同，可將細菌分成兩類，即革蘭氏陽性與革蘭氏陰性。
這一染色方法由丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年所發(fā)明，最初是用來鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關(guān)系，后推廣為鑒別細菌種類的重要特性之一。
擴展資料
革蘭氏染色法的原理：
通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小；
再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；
而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
因為第三步驟酒精脫色時間太短，革蘭氏陰性菌脫色不到位，導(dǎo)致在顯微鏡下革蘭氏陰性菌被判斷為革蘭氏陽性。酒精脫色是非常重要的一步，也是革蘭氏染色成功與否的關(guān)鍵。
革蘭陽性細菌的肽聚糖層較厚，經(jīng)乙醇處理后使之發(fā)生脫水作用而使孔徑縮小，結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物保留在細胞內(nèi)而不被脫色，成為紫色；
而革蘭陰性細菌的肽聚糖層很薄，脂肪含量高，經(jīng)乙醇處理后部份細胞壁可能被溶解并改變其組織狀態(tài)，細胞壁孔徑大，不能阻止溶劑透入，因而將結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物洗去而被脫色。
擴展資料：
革蘭氏陽性細菌：金黃葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、利斯特菌等
革蘭氏陰性桿菌：克雷白桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、流感嗜血桿菌、沙門氏菌等
無論陽性菌還是陰性菌都有桿菌和球菌。葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌是臨床最為常見的病原菌，葡萄球菌屬于革蘭陽性球菌，大腸桿菌屬于革蘭陰性菌中的腸桿菌科，除大腸桿菌以外，臨床較常見的腸桿菌科細菌還有變形桿菌、沙門氏菌、克雷白桿菌；綠膿桿菌屬于假單胞菌，為非發(fā)酵菌，是臨床常見的較耐藥革蘭陰性桿菌。
參考資料來源：百度百科-革蘭陰性菌
以上就是微生物染色的全部內(nèi)容，機制：對細菌細胞壁的詳細分析，為解釋革蘭氏染色的機制提供了較充分的基礎(chǔ)。目前多用物理機制來解釋革蘭氏染色現(xiàn)象。革蘭氏染色結(jié)果的差異主要基于細菌細胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分不同。通過初染和媒染，在細菌細胞膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。G+ 細菌由于細胞壁較厚、。
