下列是生物學技術制備抗體？抗體是由效應B細胞分泌，參與體液免疫．（2）效應B細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，即能分泌特異性抗體，又能無限繁殖，進而產生單克隆抗體．（3）③至⑥流程屬于轉基因技術，原理是基因工程．過程⑤基因表達載體的構建需要限制性內切酶和DNA連接酶．V1基因體外擴增的技術為（聚合酶鏈式反應），那么，下列是生物學技術制備抗體？一起來了解一下吧。
（1）多克隆抗體的制備。
①免疫方法：對多克隆抗體，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內免疫法、淋巴結免疫法和混合法等。一般來說，皮下或肌肉免疫法產生的抗體比較多；皮內免疫法所需的抗原量少，在抗原寶貴時特別適用，但與之相對的，它產生的抗體量也不多。混合免疫法的優點是抗原用量小，產生抗體速度快。
②多克隆抗體的制備：將抗原免疫動物（常用的動物為兔、羊、狗等），分離出抗血清并純化抗體。多克隆抗體的均一性較差，其特異性相對較低，因此，多克隆抗體在農藥殘留速測技術中的應用受到一定的限制。但近年來有學者恰恰利用了多抗的交叉反應高的特點，通過制備出具有某類（或某幾種）農藥的“共性結構”的半抗原或者通過制備出含多個抗原決定簇的人工抗原來制備“寬譜特異性”抗體，進行農藥多殘留分析研究。
（2）單克隆抗體的制備。單克隆抗體制備技術最初是由K鰄ler和Milstein（1975）利用B淋巴細胞雜交瘤技術創立的。目前該技術已廣泛應用于疾病診斷及生物、醫學研究、環境和食品安全檢測（監測）等方面。單抗均一性高，只和抗原某一決定簇結合，有更高的特異性，而且，產生抗體的單克隆細胞可在體外傳代繁殖，不受動物免疫時間限制生產抗體。
【答案】B
【答案解析】試題分析：
PCR技術用于擴增核酸，不能用來擴增蛋白質；雜交瘤技術用于制備單克隆抗體；電子顯微鏡用于觀察葉綠體的基粒的亞顯微結構，光學顯微鏡用于觀察葉綠體的外部形態；花粉離體培養用于培育單倍體植物。
考點：考查PCR技術，雜交瘤技術，顯微鏡的使用，花粉離體培養。
點評：難度較小，熟記技術的應用。
Ⅰ（1）制備單克隆抗體的過程涉及到動物細胞融合和動物細胞培養兩個過程，在進行動物細胞培養時，要將動物組織剪碎，用胰蛋白酶處理，使其分散成單個細胞，制備成細胞懸液．
（2）誘導融合的細胞有三種，已免疫B細胞的自身融合細胞、骨髓瘤細胞的自身融合細胞、雜交瘤細胞；A細胞的特點是無限增殖和產生特定抗體，經選擇性培養的雜交瘤細胞，還需進行克隆化培養和抗體檢測，經多次篩選就可獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞，進行體內或體外培養．
（3）單克隆抗體的優點具有特異性強，靈敏度高，可在體外大量生產．
Ⅱ（1）從母牛體內獲得的卵母細胞需要培養到減數第二次分裂中期才能與精子受精．
（2）Ⅱ過程優質奶牛的培育過程需要進行胚胎移植，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應．
（3）對Ⅱ中囊胚進行胚胎分割移植（或胚胎分割），獲得多頭與此優質奶牛相同的小牛，注意將囊胚的內細胞團進行均等分割．否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育．
（4）通過顯微注射的生長激素基因等方法導入哺乳動物的受精卵中．若要檢測該受精卵細胞內是否含有基因X，在分子水平上通常用熒光標記作探針．
故答案為：
Ⅰ（1）動物細胞融合胰蛋白酶
（2）無限增殖和產生特定抗體克隆化培養
（3）特異性強，靈敏度高
Ⅱ（1）減數第二次分裂中期
（2）受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應
（3）胚胎分割移植注意將囊胚的內細胞進行均等分割
（4）顯微注射熒光標記的生長激素基因
Ⅰ、（1）向健康人體注射特定抗原，提取出A漿細胞（效應B淋巴細胞），在人體參與體液免疫．
（2）過程①至②抗體的獲取稱為單克隆抗體，其中①是細胞融合過程，Y細胞稱為雜交瘤細胞．
Ⅱ、（1）SmaⅠ識別的序列為GGGCCC，切割會產生平末端；圖1中DNA片段含有兩個SmaⅠ識別位點，第一個識別位點在左端534 bp序列向右三個堿基對的位置；第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基的位置，從而兩個位點切割后產生的DNA片段的長度分布為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長度為537、790、661．
（2）在雜合子體內含有基因D和基因d，基因D的序列中含有兩個識別位點，經過SmaI完全切割會產生537bp、790bp和661bp三種不同長度的片段，基因d的序列中含有一個識別位點，經過切割后會產生1327bp和661bp兩種長度的片段，綜上，雜合子中分離到該基因的DNA片段經過切割后會產生4種不同長度的片段．
（3）能夠獲取目的基因并切開質粒的限制酶有識別序列為GGATCC的BamH I和識別序列為GATC的MboI，若使用Mbo I會同時破壞質粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I來切割目的基因和質粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質粒的大腸桿菌．因為目的基因和運載體是用同種限制酶切割的，目的基因兩端的末端和質粒切割后的兩個末端都能進行互補，可能出現目的基因反向連接在運載體上的情況，導致基因D不能正確表達．
故答案為：
Ⅰ、（1）、漿細胞（效應B淋巴細胞）體液
（2）、單克隆抗體細胞融合雜交瘤細胞
Ⅱ、（1）、537、790、661（寫全給分）
（2）、4
（3）、BamHⅠ
抗體制備技術對比，雜交瘤與噬菌體展示
雜交瘤技術，源自體細胞融合，由克勒與米爾斯坦于1975年發現。這項技術通過將骨髓瘤細胞與免疫動物的脾細胞融合，生成能分泌特異性高純度單克隆抗體的細胞。在免疫組化和多種細胞生物學技術中，雜交瘤技術發揮著核心作用。然而，它的長制備過程及對完整抗原表位識別的不足，限制了它的應用。
噬菌體展示技術，運用噬菌體外殼蛋白隨機重組抗體重鏈可變區和輕鏈可變區基因，感染大腸桿菌。噬菌體繁殖、組裝并分泌至培養基中，結合抗原的噬菌體可被分離、擴增及純化。這種方法能簡便快速篩選大量克隆。在基因工程重組技術支持下，噬菌體展示技術在高端抗體應用領域成果顯著。
總體而言，噬菌體展示技術在技術要求上較高。義翹神州歷經多年探索與積累，自主建設噬菌體抗體庫技術生產平臺，熟練掌握鼠單抗、兔單抗制備技術。相比人工免疫與雜交瘤技術，噬菌體展示技術避開了細胞不穩定性問題，方法簡單高效，便于大規模發酵生產，篩選容量大，數周內可篩選百萬至億個克隆。它模擬體內免疫過程與天然全套抗體庫，可任意克隆抗原抗體，展示出廣泛的應用潛力。
噬菌體展示技術發展勢頭強勁，其價值不僅限于抗體制備，已廣泛應用于免疫學、細胞生物學、藥理學與蛋白質工程。
以上就是下列是生物學技術制備抗體的全部內容，【答案解析】試題分析：PCR技術用于擴增核酸，不能用來擴增蛋白質；雜交瘤技術用于制備單克隆抗體；電子顯微鏡用于觀察葉綠體的基粒的亞顯微結構，光學顯微鏡用于觀察葉綠體的外部形態；花粉離體培養用于培育單倍體植物。考點：考查PCR技術，雜交瘤技術，顯微鏡的使用，花粉離體培養。點評：難度較小，內容來源于互聯網，信息真偽需自行辨別。如有侵權請聯系刪除。
