目錄生物素修飾抗體 biotin生物素標(biāo)記抗體原理 生物素化檢測(cè)抗體 biotin生物素標(biāo)記抗體 生物素抗體標(biāo)記
如果是同公司同貨號(hào)的抗體,差異就是在生物素上,生物素化的抗體是在一扮鄭抗嘩缺薯上偶聯(lián)了生物素,這樣可以亂者在下游檢測(cè)時(shí)通過親和素放大一抗的信號(hào)強(qiáng)度,而未生物素化的抗體,需要二抗用anti特異種屬的來進(jìn)行信號(hào)放大。
商品化抗體一般都是生物素標(biāo)輪橘記的
在做western blot或免疫組化時(shí)我們常使用一抗二抗來放大、顯示抗原,用酶或熒光標(biāo)記二抗.生物素化的抗體,是在抗體上連接生物素(biotin),生物素能和親和素(avitin)特異性高親和性結(jié)陵空合,親和力是抗原抗體結(jié)合的一萬倍,而且一個(gè)avitin可以結(jié)合四個(gè)biotin,這樣又起到級(jí)聯(lián)放大的作用.所以能更加靈臘汪團(tuán)敏的顯示微量抗原.這種方法也叫親和免疫組化.
主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方唯知面。
1放射免疫測(cè)定中的應(yīng)用
BAS主要與免疫放射分析(IRMA)檢測(cè)體系偶聯(lián),用于對(duì)終反應(yīng)的放大(BA法):先將針對(duì)不同抗原決定簇的固相抗體和生物素化抗體與抗原(標(biāo)準(zhǔn)抗原和待測(cè)抗體)同時(shí)反應(yīng),在固相載體表面形成雙抗體夾心免疫復(fù)合物;再租州加入125I標(biāo)記的親和素(或鏈霉親和素)與復(fù)合物中的生物素結(jié)合,最終使反應(yīng)信號(hào)放大,進(jìn)一步提高IRMA的靈敏度。如該用于測(cè)定促甲狀腺激素(TSH)時(shí),由于方法的高靈敏性,即可將甲亢患者降低的TSH水平與正常值低限有效地予以區(qū)別。此外,BAS也可用于IRMA反應(yīng)后B、F成分的分離:先將生物素化的McAb和放射性核素標(biāo)記的McAb與抗原的不同抗原決定簇結(jié)合,反應(yīng)平衡后,加入表面偶聯(lián)有親和素的聚苯乙烯珠與免疫復(fù)合物中的生物素連接成固相終產(chǎn)物。該法的優(yōu)點(diǎn)是克服了其他指型消IRMA法需多次離心的麻煩.待測(cè)復(fù)合物與固相結(jié)合更牢固,操作更簡(jiǎn)便。
2在分子生物學(xué)中的應(yīng)用
BAS在分子生物學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用日漸增多,目前主要集中在以生物素標(biāo)記核酸探針進(jìn)行的定位檢測(cè),用BAS制備的親和吸附劑進(jìn)行基因的分離純化以及將免疫測(cè)定技術(shù)與PCR結(jié)合建立免疫—PCR(immuno-PCR)用于抗原的檢測(cè)等三方面。
【鉛嫌差答案】:D
ABC為親和素-生物素化酶復(fù)合物技術(shù);LAB為者信標(biāo)記親和素-生物素槐皮的方法;直接法為生物素化第一抗體;間接法BAS為生物素化第二抗體。
可以。和其他抗體的保存方法一樣。生物素非常穩(wěn)定,而且大納一旦標(biāo)記到抗體上后就不會(huì)脫落。所桐冊(cè)以只要按照普通抗體的保存方法保存就可以了。
生物素只有在長(zhǎng)時(shí)間暴露局仿宏在紫外下才會(huì)分解,其他時(shí)候都非常穩(wěn)定的。