微生物的實(shí)驗室培養(yǎng)？6、接種培養(yǎng)。接種后，也是倒置培養(yǎng)（原因同 5 所說）倒置后還可以防止培養(yǎng)基水分蒸過快發(fā)，培養(yǎng)基變干，無機(jī)鹽析出，營養(yǎng)成分濃度變大，不能使用，不利于微生物的生長。不過，分裝后的培養(yǎng)皿應(yīng)盡快使用，那么，微生物的實(shí)驗室培養(yǎng)？一起來了解一下吧。

微生物課程收獲與感想

你是倒平板后才滅菌嗎？

我坦攜們做實(shí)驗都不是這樣的，都是先配制培養(yǎng)基，畢仔比如用三角瓶裝，滅菌后在無菌操作臺上無菌操作條件下倒平板的，凝固后，才可能倒置放置。

培養(yǎng)時候倒置是為了減少培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)，因為除了常見的變形菌目的細(xì)菌，如革蘭氏陰性菌大腸桿菌之類的生長很快以外，不少微生物都需要培養(yǎng)較長時間，一兩周到四五周不等讓數(shù)伏。這時不光要倒置，培養(yǎng)間或培養(yǎng)箱中還要放一些裝水的燒杯，補(bǔ)充空間水分，最好能有設(shè)備可以實(shí)時控制空間濕度。

實(shí)驗室培養(yǎng)微生物的條件

一)實(shí)驗?zāi)康?1)了解空氣中微生物的分布狀況。(2)比較普通實(shí)驗室和無菌室空氣中存在的微生物的數(shù)量和種類。(3)驗證無菌操作法在微生物學(xué)實(shí)驗中的重要性。

（二）實(shí)驗原理在我們周圍的環(huán)境中存在著種類繁多、數(shù)量龐大的微生物。空氣中也不例外。雖然空氣不是微生物棲息的良好環(huán)境。但由于氣流、灰塵和水沫的流動枝盯，人和動物的活動等原因，仍有相當(dāng)數(shù)量的微生物存在。當(dāng)空氣中個體微小的微生物落到適合于它們生長繁殖的固體培養(yǎng)基的表面時，在適溫下培養(yǎng)一段時間后，每一個分散的菌體或孢子就會形成一個個肉眼可見的細(xì)胞群體即菌落。觀察大小、形態(tài)各異的菌落，就可大致鑒別空氣個存在的微生物的種類。本實(shí)驗通過檢測普通實(shí)驗室和消毒后的無菌室空氣中存在的微生物，從而判斷無菌室的消毒效果，了解空氣中常見的微生物類群。

（三)實(shí)驗器材(1)培養(yǎng)基：1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。2)馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。(2)器材：無菌平皿若干套，酒精燈，培養(yǎng)箱等。

(四〕實(shí)驗方法(1)倒平板：按常法配置上述培養(yǎng)基，分裝于三角瓶中，高壓滅菌備用。臨用前將培養(yǎng)基熔化，冷卻至50℃左右，倒平板若干個備用。(2)檢測：先將無菌室的紫外燈打開，照射15min后關(guān)閉。打開上述冷凝和并了的無菌平板的皿蓋，讓其在無菌室空間和無人走動的普通實(shí)驗室空間分別暴露Ih后，蓋上皿蓋。

微生物培養(yǎng)的四種方法

大多數(shù)細(xì)菌均可以通過人工方法培養(yǎng)，而衣原體和病毒的分離培養(yǎng)往往需要活組織、雞胚、特殊細(xì)胞株及動物接種。只有將微生物培養(yǎng)出來才能對它進(jìn)行研究、鑒定和應(yīng)用，對于魚類細(xì)菌性疾病的認(rèn)定很有幫助。

一、接種與分離方法

根據(jù)待檢標(biāo)本的性質(zhì)、培養(yǎng)目的和所用培養(yǎng)基的種類，采用不同的接種方法。

1．平板劃線分離培養(yǎng)法

對混有多種細(xì)菌的臨床標(biāo)本，采用劃線分離和培養(yǎng)，使原來混雜在一起的細(xì)菌沿劃線在瓊脂平板表面分離，得到分散的單個菌落，以獲得純種。臨床送檢的標(biāo)本如痰、咽試子、泌尿生殖道的分泌物和糞便等細(xì)菌檢驗均需要借助瓊脂平板劃線分離目的菌。平板劃線分離法通常有兩種方法：

（1）分區(qū)劃線分離法：此法常用于含菌量較多的標(biāo)本如痰、泌尿生殖道的分泌物和糞便或混合細(xì)菌的分離。先用接種環(huán)挑取標(biāo)本涂布于瓊脂平板1區(qū)（占培養(yǎng)基總面積的?）并作數(shù)條劃線，再于2、3、4區(qū)依次劃線。每劃完一個區(qū)域，均將接種環(huán)燒灼滅菌1次，冷后再劃下一區(qū)域，每一區(qū)域的劃線均與上一區(qū)域的劃線交接1~3次。一個成功分區(qū)劃線的平板，培養(yǎng)后分別觀察1區(qū)形成菌苔，2區(qū)菌落連成線，3區(qū)和4區(qū)可分離到單個菌落。

（2）連續(xù)劃線分離法：此法常用于含菌量不多的標(biāo)本或培養(yǎng)鏈盯物中的細(xì)菌分離培養(yǎng)。

微生物實(shí)驗反思與總結(jié)

1905年，德國微生物學(xué)家科赫因?qū)Y(jié)核桿菌和結(jié)核菌素的研究取得重大成就而榮獲諾貝爾獎金。他發(fā)明固體培養(yǎng)基，用它分離培養(yǎng)細(xì)菌，創(chuàng)造細(xì)菌的純粹培養(yǎng)法。他又改進(jìn)細(xì)菌染色法，為研究細(xì)枝氏菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)創(chuàng)造有利條件。荷蘭科學(xué)家E．C．翰遜教授研究使啤酒發(fā)酵的酵母，創(chuàng)造單細(xì)胞的純粹培養(yǎng)法。以后，又有人采用純粹培養(yǎng)法選擇適當(dāng)酵母，用于啤酒的工業(yè)生產(chǎn)，為純粹培養(yǎng)法在工業(yè)發(fā)酵上的應(yīng)用開辟了道路。翰遜的學(xué)生哈斯發(fā)現(xiàn)，當(dāng)時用的由明膠制成的固體培養(yǎng)基很容易發(fā)生液化現(xiàn)象，使用時有困難。哈斯的妻雹搭念子建議用瓊脂源困代替明膠，獲得了較好的效果。這種瓊脂培養(yǎng)基被后人采用，一直沿用到今天。后來又有人創(chuàng)造一種培養(yǎng)皿，可供微生物平板分離用。從此以后，分離出的微生物日益增多，新的微生物不斷被發(fā)現(xiàn)。這樣，可供工業(yè)用的微生物也日益充實(shí)起來，一支微生物生力軍異軍突起。

微生物實(shí)驗設(shè)計

1．平板劃線分離培養(yǎng)法

對混有多種細(xì)菌，采用劃線分離和培養(yǎng)，使原來混雜在一起的細(xì)菌沿劃線在瓊脂平板表面分離，得到分散的單個菌落，以芹指虧叢獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法：

①分區(qū)劃線分離法：此法常用于含菌量較多的細(xì)菌的分離。先用接種環(huán)挑取標(biāo)本涂布于瓊脂平板1區(qū)（占培養(yǎng)基總面積的?）并作數(shù)條劃線，再于2、3、4區(qū)依次劃線。每劃完一個區(qū)域，均將接種環(huán)燒灼滅菌1次，冷后再劃下一區(qū)域，每一區(qū)域的劃線均與上一區(qū)域的劃線交接1~3次。一個成功分區(qū)劃線的平板，培養(yǎng)后分別觀察1區(qū)形成菌苔，2區(qū)菌落連成線，3區(qū)和4區(qū)可分離到單個菌落。

②連續(xù)劃線分離法：此法常用于含菌量不多的標(biāo)本或培養(yǎng)物中的細(xì)菌分離培養(yǎng)。方法是先將接種物在瓊脂平板上1/5處輕輕涂抹，然后再用接種環(huán)或拭子在平板表面曲線連續(xù)劃線接種，直至劃滿瓊脂平板表面。

2.瓊脂斜面接種法

主要用于菌落的移種，以獲得純種進(jìn)行鑒定和保存菌種等。用接種環(huán)（針）挑取單個菌落或培養(yǎng)物，從培養(yǎng)基斜面底部向上劃一條直線，然后再從底部沿直線向上曲折連續(xù)劃線，直至斜面近頂端處止。生化鑒定培養(yǎng)基斜面接種，用接種針挑取待鑒定細(xì)菌的菌落，從斜面中央垂直刺入底部，抽出后在斜面上由下至上曲折劃線接種。

以上就是微生物的實(shí)驗室培養(yǎng)的全部內(nèi)容，①搖床培養(yǎng)法，即將微生物接種于盛有液體培養(yǎng)基的三角瓶后，放在恒溫培養(yǎng)室中的搖床上作有節(jié)奏的振蕩，使空氣不斷進(jìn)入培養(yǎng)液中，促其良好生長;②淺盤培養(yǎng)法，又稱表面培養(yǎng)法，在盤內(nèi)放一淺層培養(yǎng)基。